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人胸椎黄韧带BMP.doc
文档介绍:
人胸椎黄韧带BMP
顾树明田纪伟徐林贾连顺
【关键词】人胸椎
摘要:[目的]研究不同年龄组胸黄韧带中BMP2和TGFβ基因表达规律。[方法]利用BMP2和TGFβ cDNA探针,对不同年龄组的黄韧带冰冻切片进行原位杂交,用VIDAS图像分析仪分析。[结果]20岁以下组,有明显的TGFβ表达,无BMP2表达;21~40岁组,黄韧带的附着点处有少量的BMP2和TGFβ阳性表达信号。41~60岁组,在附着点处TGFβ表达较弱,但BMP2表达相对增强。61岁以上组,TGFβ无表达,附着点处有呈簇状BMP2阳性表达信号。VIDAS图像分析显示各组间差异有显著性。[结论]随着年龄的增长,TGFβ表达逐渐减弱,在附着点处出现BMP2的表达。
关键词:人胸椎;黄韧带; BMP2和TGFβ; 基因表达
Abstract:[Objective]To observe the gene expression of collagen BMP2 (bone morphogeic protein2) and TGFβ(transforming groan thoracic ligamentum flavum[Method]BMP2 and TGF13 probes [Result](1) Under 20 years group:the positive gene expression of TGFβ al ligamentum,there is expression of TGFβ gene,but it decreases erges and enhances in the insertion part of ligamentum flavum
Key an; Thoracic; Ligamentum; Flavum; BMP2 and TGFβ; Gene expression
在黄韧带中除了弹性纤维以外,主要是Ⅰ型胶原。Ⅰ型胶原抗牵张能力强,在黄韧带中耐受牵拉,并且有一定的预张力,对维持脊柱的稳定有重要作用。Ⅱ型胶原为软骨胶原,在正常的黄韧带中含量极少, 文献报道细胞因子BMP2和TGFβ在动物黄韧带退变过程中表达有一定的变化,本文探讨了BMP2和TGFβ基因表达增龄性变化在人胸椎黄韧带退变过程中的意义。
1 材料和方法
11 实验材料
111 黄韧带标本
21个胸椎黄韧带标本取自椎间盘突出症和椎管狭窄的接受手术病人,正常对照组取自青少年胸椎骨折的病人。术前的影像学检查和术中探查均无韧带骨化,手术取出后立即放入-196 ℃液氮中备用。
112 cDNA探针
BMP2和TGFβ cDNA探针由中国预防医学科学院劳动卫生研究所刘秉慈教授提供。
12 实验方法
121 组织切片、固定
组织从液氮中取出后,立即OCT包埋,冰冻切片(切片机以***、乙醇处理),切片厚度为5 μm。切片置PBS缓冲的4%的多聚甲醛(pH 74)中固定10 min,PBS洗涤2 min×3。37 ℃干燥2 h,密封,置-70 ℃深低温冰箱备用(以上所有试剂均以DEPC处理的双蒸水配制)。
122 探针的标记(***随机引物法标记)〔1〕
123 组织切片上的原位杂交
共分5组:20岁以下组,21~40岁组,41~60岁组和61 内容来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.
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